Fixable Viability Dye死活细胞鉴定染料

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一、为什么要进行细胞鉴定？

★ 死细胞带来非特异性染色

★ 会导致背景增高，影响检测数据的灵敏度

★ 死细胞染色影响正常的结果比例

二、Fixable Viability Dye（FVS）与传统染料PI/7-AAD有和区别？

1）PI、7-AAD的问题

PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗体孵育完成后进行，不能洗涤即要上机检测；

对于胞内抗体的染色，由于经过了固定步骤，经过PI或7-AAD染色后所有的细胞都是阳性，所以它们只适合胞膜染色的死活细胞鉴定。

而PI、7-AAD与常用染色通道PE PerCP是同一检测通道，二者只能选择其一使用。

PI和7AAD发射谱很很宽，488 nm蓝色激光发射基本上580BP和690BP都被占用，这样大大减小了多色试验中的配色和调补偿的难度

2）Fixable Viability Dye的优点是：

▶ 固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色

▶ Fixable Viability Dye的光谱多样，适合各种染色组合的搭配。FVS系列有多种，分别对应不同的激光器，发射出不同波长的光，而且发射谱很集中。

三、Fixable Viability Dye使用原理

FVS为氨基反应性染料，与细胞表面或者内部的蛋白不可逆的结合。FVS是染细胞表面或膜内侧的游离胺，活细胞弱阳，死细胞强阳。正是由于和PI 、7-AAD原理不同，所以对于一些需要固定破膜步骤的试验FVS一样适用，如果固定破膜后细胞发生死亡，该染料还是能反应细胞的死活情况，这点是核酸染料所不能替代的。

实验原理图：

实验结果图：

四、订购产品清单

货号

产品名称

规格

562247

BD Horizon Fixable Viability Stain 450

0.1mg

564406

BD Horizon Fixable Viability Stain 510

0.1mg

564407

BD Horizon Fixable Viability Stain 520

0.15mg

564405

BD Horizon Fixable Viability Stain 660

0.1mg

FVS450

FVS510

FVS520

FVS660

激发波长

404nm

408nm

498nm

649nm

发射波长

448nm

512nm

521nm

660nm

激光器

405nm紫色激光

405紫色激光

488nm蓝色激光

633nm红色激光

替代

荧光染料

V450, BV421

Pacific Blue™

V500, BV510

FITC, Alexa Fluor 488

APC, Alexa Fluor 647

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